Testy krzyżowe: do czego służą, technika i podstawy, fazy

Testy krzyżowe to seria badań laboratoryjnych przeprowadzanych w celu ustalenia, czy produkty krwi dawcy (głównie krew pełna i koncentrat globularny) są zgodne z krwią biorcy.

Jest to test uzupełniający oprócz zgodności ABO i czynnika Rh. Powodem badania krzyżowego jest to, że czasami dwie osoby (dawca-biorca) mogą mieć tę samą grupę ABO i Rh, ale ich krew jest nadal niekompatybilna.

Taka niezgodność jest spowodowana obecnością przeciwciał przeciwko szeregowi białek krwinek czerwonych znanych jako drobne antygeny. Antygenów tych nie ocenia się rutynowo, tak jak w przypadku grupy krwi (ABO) i czynnika Rh.

Dzieje się tak, ponieważ drobne antygeny są znacznie rzadsze i mają zmienną ekspresję u każdego osobnika, dlatego praktycznie niemożliwe jest pogrupowanie ich w kategorie, tak jak w przypadku grupy i czynnika Rh.

Zamiast tego czerwone krwinki dawcy miesza się z surowicą pacjenta (główny test zgodności) i czerwonymi krwinkami pacjenta z surowicą dawcy (drobny test zgodności) w celu wykrycia obecności reakcji antygen-przeciwciało.

Gdy istnieją przeciwciała przeciwko drobnym antygenom, w surowicy pacjenta lub dawcy, mówi się, że test jest dodatni, więc w większości przypadków tej konkretnej jednostki krwi nie można przetoczyć.

Grupa ABO

Aby dobrze zrozumieć, że reakcje krzyżowe są traktowane jako pierwsze, konieczne jest poznanie podstaw dotyczących grup krwi.

W tym sensie najważniejszą rzeczą jest wiedzieć, że krew można podzielić na cztery grupy: A, B, AB i O.

Każda z tych grup wyraża na powierzchni czerwonych krwinek określone białko (antygen), które jest identyfikowane jako obcy element przez przeciwciała potencjalnego receptora innej grupy.

Najbardziej uderzającą reakcją antygen-przeciwciało we krwi jest to, że nie ma potrzeby wcześniejszej ekspozycji na antygen, aby przeciwciała istniały. Jest to znane jako naturalne przeciwciała.

Naturalne przeciwciała

Ogólnie, aby przeciwciała istniały w ciele osobnika, konieczne jest, aby białe krwinki były wcześniej wystawione na działanie antygenu.

Oznacza to, że przy pierwszym kontakcie obcego antygenu z organizmem nie ma przeciwciał, ponieważ są one generowane później, po początkowym kontakcie. Dlatego układ odpornościowy nie może mieć przeciwciał przeciwko np. Konkretnemu wirusowi, jeśli nie był wcześniej narażony na jego działanie.

Jedynym wyjątkiem od powyższego są antygeny anty AB. W takich przypadkach osoba ma przeciwciała przeciwko antygenowi, których ich czerwone krwinki nie mają, nawet jeśli nigdy nie miały kontaktu z czerwonymi krwinkami innej osoby. Jest to znane jako naturalne przeciwciała.

Antygeny i przeciwciała związane z grupą krwi

Grupy krwi są określane w przypadku systemu ABO przez obecność specyficznych antygenów (A lub B) w błonie czerwonych krwinek i, przeciwnie, przeciwciała przeciw antygenowi nie występują w błonie erytrocytów.

Tak więc osoba z grupą krwi A wyraża antygen A na powierzchni czerwonych krwinek, podczas gdy w surowicy znajdują się przeciwciała anty-B.

Przeciwnie, u pacjentów z grupy B stwierdzono antygen B, podczas gdy przeciwciała są anty-A.

Teraz pacjenci z krwią AB mają zarówno antygeny A, jak i B. Dlatego nie ma przeciwciał, ponieważ mogłoby to zniszczyć krwinki czerwone tej osoby.

Odwrotność występuje w grupie O, gdzie błona erytrocytów nie przedstawia żadnego z dwóch antygenów (ani A, ani B), podczas gdy w surowicy znajdują się przeciwciała anty-A i anty-B.

Niezgodność grupy ABO

Z powyższego wynika, że zgodność grup krwi ABO można łatwo wywnioskować, ponieważ antygen błony erytrocytarnej jest automatycznie znany jako przeciwciała w surowicy. Więc:

- Blood A jest zgodny z grupą A i grupą O.

- Grupa krwi B jest zgodna z krwią B i O.

- Osoby z grupą O mogą otrzymywać tylko O krwi (ponieważ mają przeciwciała anty-A i anty-B), chociaż ich krew jest odbierana przez wszystkie inne grupy bez problemów, ponieważ brakuje im antygenów.

- Wreszcie. Ci, którzy mają grupę krwi AB, mogą otrzymywać krew od wszystkich innych grup (A, B, O i oczywiście AB), ponieważ nie mają przeciwciał przeciwko żadnemu z antygenów. Jednak tylko osoby z AB mogą otrzymywać krew AB, ponieważ wszystkie inne grupy mają przeciwciała, które mogłyby zniszczyć te krwinki czerwone.

Drobne antygeny

Podobnie jak w przypadku grup ABO, na powierzchni erytrocytów można znaleźć serię białek, które działają jak antygeny, jak w przypadku antygenów grupy ABO.

Jednak te antygeny nie występują u wszystkich osobników. Jego kombinacja jest niejednorodna, a przenikanie (poziom ekspresji białka) jest zmienne, dlatego niemożliwe jest sklasyfikowanie w grupach takich jak ta, która istnieje dla ABO i Rh. Stąd wywodzi swoją nazwę od „drobnych antygenów”, znanych również jako „antygeny o niskiej częstości występowania”.

Chociaż nie są częste, mogą występować naturalne przeciwciała przeciwko drobnym antygenom. Wśród nich najbardziej popularne to Lewis, MNSs, anty N, Kell, Duffy, anty Fyb i Kidd. Wszystkie z nich są odpowiedzialne za bardzo poważne reakcje hemolityczne i postfuzyjne.

Ponadto mogą występować przypadki uwrażliwienia na drobne antygeny przez uprzedni kontakt, z wymienionymi białkami antygenowymi z powodu wcześniejszych transfuzji lub z powodu odporności krzyżowej.

Odporność krzyżowa

Mówi się, że istnieje odporność krzyżowa, gdy dwa antygeny z dwóch różnych źródeł (na przykład czerwonych krwinek i bakterii) są bardzo podobne, do tego stopnia, że przeciwciała przeciwko jednemu ze wspomnianych białek antygenowych również reagują z drugim, ponieważ są prawie identyczne,

Aby lepiej to zrozumieć, weźmy poprzedni hipotetyczny przykład (antygeny krwinek czerwonych i bakterii). W żadnym przypadku nie istnieją naturalne przeciwciała, ale jeśli dana osoba jest narażona na działanie bakterii, wytworzy przeciwko niej przeciwciała.

Takie przeciwciała będą reagować później na czerwone krwinki, jeśli antygeny tego są bardzo podobne do tych z bakterii, które indukowały tworzenie przeciwciał.

Jeśli tak się stanie, czerwonych krwinek z tym konkretnym białkiem antygenowym nie można podać osobie, która ma przeciwciała, ponieważ nastąpiłoby odrzucenie. Tu leży znaczenie reakcji krzyżowych.

Do czego służą testy krzyżowe?

Ponieważ nie jest możliwe scharakteryzowanie krwi różnych osobników w grupach na podstawie mniejszych antygenów, jedynym sposobem, aby dowiedzieć się, czy we krwi osoby znajdują się przeciwciała przeciwko mniejszym antygenom czerwonych krwinek innego, są testy krzyżowe,

W tych przypadkach, w których obecne są przeciwciała, wyzwala się reakcja hemolizy lub aglutynacji, więc stwierdza się, że reakcja była dodatnia; to znaczy, istnieją przeciwciała przeciwko drobnym antygenom (chociaż nie wiadomo dokładnie, co). W przeciwnym razie test jest negatywny.

Fundacja

Testy krzyżowe opierają się na reakcji antygen-przeciwciało. Dzięki temu możliwe jest wykrycie, czy w surowicy receptora znajdują się przeciwciała przeciwko antygenom czerwonych krwinek dawcy (lub odwrotnie) indukujące reakcję antygen-przeciwciało.

Jeśli nie ma przeciwciał, nie występuje reakcja i test jest zgłaszany jako negatywny. I odwrotnie, jeśli reakcja jest pozytywna (w trakcie testu występuje hemoliza lub aglutynacja), można stwierdzić, że przeciwciała są obecne.

W związku z tym ważne jest, aby pamiętać, że w surowicy dawcy i biorcy mogą występować przeciwciała przeciwko krwinkom czerwonym. Z tego powodu istnieją dwa rodzaje reakcji krzyżowych.

Rodzaje reakcji krzyżowych

Możliwe, że w surowicy pacjenta znajdują się przeciwciała przeciwko erytrocytom dawcy; ale może być również odwrotnie, to znaczy przeciwciała w surowicy dawcy przeciwko czerwonym krwinkom pacjenta.

Dlatego istnieją dwa rodzaje testów krzyżowych:

- Większy test krzyżowy.

- Niewielki test krzyżowy.

Oba typy są rutynowo wykonywane w banku krwi przed transfuzją produktów krwiopochodnych, zważywszy, że jeśli którykolwiek z testów jest pozytywny, istnieje wysokie ryzyko reakcji transfuzyjnych, które mogą zagrozić życiu pacjenta.

Większy test krzyżowy

W tym teście ocenia się, czy w surowicy biorcy znajdują się przeciwciała przeciwko czerwonym krwinkom dawcy.

Jeśli tak się stanie, nie można podawać produktów krwiopochodnych, ponieważ duża liczba przeciwciał znajdujących się w osoczu pacjenta bardzo szybko zniszczy krwinki czerwone dawcy, wywołując w tym procesie katastrofalne reakcje w ciele biorcy. Reakcje te są tak poważne, że mogą zagrozić Twojemu życiu.

Drobny test krzyżowy

W takim przypadku określa się, czy w surowicy dawcy są przeciwciała przeciwko krwinkom czerwonym biorcy.

Jeśli tak, przeciwciała zaczną niszczyć erytrocyty receptora. Jednakże, ponieważ ilość przeciwciał jest ograniczona, reakcja jest mniej intensywna; chociaż nadal jest niebezpieczne.

Fazy

Zarówno główne, jak i drobne testy krzyżowe są podzielone na trzy fazy:

- Salina.

- Termiczne lub inkubacja.

- Coombs.

W pierwszej fazie czerwone krwinki i surowicę miesza się w soli fizjologicznej. Następnie dodaje się albuminę i próbkę inkubuje się w 37 ° C przez 30 minut, aby ostatecznie przejść do fazy coombs.

Technika

Technika testowania krzyżowego jest stosunkowo prosta, ponieważ polega na dodaniu krwinek czerwonych dawcy do surowicy pacjenta (główny test krzyżowy), a także erytrocytów biorcy do surowicy dawcy (drugorzędowy test krzyżowy).

Aby wywołać reakcję antygen-przeciwciało w stosunkowo krótkim czasie, należy wykonać szereg standaryzowanych etapów. Kroki te są podsumowane w uproszczony sposób poniżej.

Ważne jest, aby pamiętać, że w poniższej sekcji opisany jest większy test kompatybilności, chociaż etapy są takie same dla drobnego testu zgodności, ale wymiana pochodzenia czerwonych krwinek i surowicy.